【替抗連載97】產氣莢膜梭菌誘導的壞死性腸炎下，枯草芽孢桿菌DSM32315（B21）和地衣芽孢桿菌B26替代恩拉霉素對肉雞腸道和生長性能的影響-中國飼料行業信息網-立足飼料，服務畜牧

導言：2020“飼料禁抗”實錘落地，從“有抗”到“無抗”，如何才能有效替代飼料中的促生長藥物飼料添加劑？拒絕忽悠，拿數據說話！“綠養先蹤第4季”活動收集、整理、發布行業內一線企業的動物替抗試驗研究成果，為行業“無抗飼料”的配制提供第一手可供參考的試驗數據支持。

試驗目的：與恩拉霉素對照，研究枯草芽孢桿菌DSM32315和地衣芽孢桿菌B26對肉雞腸道和生長性能的影響

試驗單位：西北農林大學動物科學技術學院，尼日利亞索科托州索科托謝胡沙加里教育學院，Cholistan獸醫與動物科學大學動物生產與技術學院動物營養系

替抗產品：枯草芽孢桿菌DSM32315：商品名--固達暢^®GutCare（贏創動物營養生產提供）

試驗設計：

480只1日齡愛撥益加肉雞隨機分成四個處理組，每組10籠，每籠12只。四個處理組分別是：（a）基礎日糧對照，不含益生菌和抗生素；（b）基礎日糧+恩拉霉素（5毫克/公斤）；（c）基礎日糧+枯草芽孢桿菌 DSM 32315 (500克/噸飼料，含量為1×10⁶CFU/克飼料)；（d）基礎日糧+地衣芽孢桿菌B26（500克/噸飼料，1×10⁶CFU/克飼料）。基礎日糧兩階段能量水平分別是2930和3060千卡路里/公斤飼料。試驗設計詳見表1。

表1試驗設計

動物	480只愛撥益加肉雞，雌雄混合，平均體重48.0+ 0.8克
重復	10欄重復/處理, 12 只/欄，4個處理
試驗周期	42天
基礎日糧	玉米豆粕型，2階段：育雛期 (1-21天)和生長期 (21-42天)
壞死性腸炎模型	1日齡口服0.5ml產氣莢膜梭菌（ (10⁸cfu/毫升） 14、15、16、17、18、19、20和21 日齡口服1毫升除對照組，其他肉雞進行上述攻毒建壞死性腸炎模型
處理	1. 基礎日糧組(未進行產氣莢膜梭菌攻毒)；2. 抗生素促生長劑組（肉雞進行產氣莢膜梭菌攻毒，添加恩拉霉素5ppm) ；3. 枯草芽孢桿菌DSM32315組（肉雞進行產氣莢膜梭菌攻毒，添加500克/噸枯草芽孢桿菌，1×10⁶CFU/克飼料) ；4. 地衣芽孢桿菌組（肉雞進行產氣莢膜梭菌攻毒，添加500克/噸地衣芽孢桿菌，1×10⁶CFU/克飼料）
檢測指標	體重、飼料轉化率、死亡率、腸道損傷、腸道形態和短鏈脂肪酸含量

試驗結果：

1.壞死性腸炎攻毒條件下，對肉雞生長性能和腸道損傷的影響

從上表可見：1-21天對照組和地衣芽孢桿菌組平均日采食量顯著高于抗生素促生長劑組和枯草芽孢桿菌組，且料比顯著提高。22到42日齡對照、抗生素促生長劑和枯草芽孢桿菌組平均日增重顯著高于地衣芽孢桿菌組（P=0.022），1-42日齡全程類似結果且抗生素促生長劑組平均日增重高于其他組。抗生素促生長劑組死亡率最高，達12.5%，未進行產氣莢膜梭菌攻毒的對照組死亡率最低，為5.5%。

圖1 攻毒后第7天和21天后處理組腸道損傷情況

從圖1可見：平均腸道損傷評分上，攻毒后第7和21天益生菌組皆高于抗生素促生長劑組，對照組未發現明顯損傷。

2.壞死性腸炎攻毒條件下，對肉雞腸道形態的影響

從上表可見：攻毒后第7天抗生素促生長劑組和益生菌組肉雞十二指腸絨毛長度和隱窩深度顯著長于對照組（P<0.001）,但對照組、抗生素促生長劑和地衣芽孢桿菌組絨毛高度/隱窩深度顯著高于枯草芽孢桿菌組。攻毒后第21天，枯草芽孢桿菌組絨毛高度和隱窩深度顯著高于其他組且對照組最低。攻毒后第7天其他組空腸絨毛高度/隱窩深度顯著高于對照組，攻毒后第21天抗生素組絨毛高度/隱窩深度顯著高于其他組（P<0.001）。在回腸段攻毒后第21天抗生素促生長劑和益生菌組絨毛高度顯著高于對照組（P<0.001）。

3.壞死性腸炎攻毒條件下，對緊密連接蛋白mRNA表達的影響

圖2 產氣莢膜梭菌攻毒后第7和21天緊密連接蛋白mRNA基因表達量（a-f）；（a）攻毒后第7天十二指腸緊密連接蛋白mRNA基因表達量；（b）攻毒后第21天十二指腸緊密連接蛋白mRNA基因表達量；（c）攻毒后第7天后空腸腸緊密連接蛋白mRNA基因表達量；（d）攻毒后第21天空腸腸緊密連接蛋白mRNA基因表達量；（e）攻毒后第7天回腸腸緊密連接蛋白mRNA基因表達量；（f）攻毒后第21天回腸腸緊密連接蛋白mRNA基因表達量

從圖2可見：攻毒后第7天地衣芽孢桿菌組十二指腸緊密連接蛋白claudin-1和ZO-1表達量顯著高于其他組(圖2a；P=0.008)，然而攻毒后第21天枯草芽孢桿菌組十二指腸緊密連接蛋白ZO-1顯著高于其他組（圖2b；P=0.0029）。攻毒后第7天地衣芽孢桿菌組空腸緊密連接蛋白claudin-1顯著高于抗生素促生長劑和枯草芽孢桿菌。與攻毒后第7天相比，第21天緊密連接蛋白claudin-1 表達量下調。地衣芽孢桿菌組緊密連接蛋白claudin-1表達量顯著高于其他組，且對照組最低。益生菌組緊密連接蛋白occludens高于對照和抗生素促生長劑組。攻讀后的第7和21天抗生素促生長劑組緊密連接蛋白ZO-1表達量顯著高于對照組（圖2d；P=0.0317），且occludin顯著上調。攻毒后的第21天，地衣芽孢桿菌ZO-1表達量高于對照組（圖2f；P=0.0008）。

4.壞死性腸炎攻毒條件下，對肉雞盲腸內容物脂肪酸含量的影響

從上表可見：攻毒后第7天地衣芽孢桿菌組丙酸含量顯著高于其他組（P<0.05）, 枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和抗生素促生長劑組丁酸含量顯著高于對照組（P=0.023）。攻毒后第 21天益生菌組總短鏈脂肪酸和乙酸含量顯著高于其他組，抗生素促生長劑組最低，且地衣芽孢桿菌組丙氨酸濃度最高。

試驗結論：

1.壞死性腸炎攻毒條件下，枯草芽孢桿菌DSM32315提高腸道短鏈脂肪酸的濃度和促進腸道緊密連接蛋白在mRNA水平上的表達，改善緊密連接和絨毛高度。

2.壞死性腸炎攻毒條件下，枯草芽孢桿菌DSM32315改善產氣莢膜梭菌誘導的壞死性腸炎癥狀。

3.壞死性腸炎攻毒條件下，枯草芽孢桿菌DSM32315改善肉雞生長性能，且與恩拉霉素效果類似。

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